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考马斯亮蓝法测定蛋白质含量流程：

该方法用于大多数蛋白质的定量是比较精que的，河池着色剂亮蓝，但不适用于小分子碱性多肽的定量。如核糖---酶或溶菌酶。去污剂的浓度超过0．2%影响测定结果。如tritonx-100、sds、np-40等。

1．bradford浓染液的配制：将100mg考马斯亮蓝g-250溶于50ml 95%---，着色剂亮蓝价格，加入100ml85%的磷酸，然后，用蒸馏水补充至1000ml，此染液放4℃至少6个月保持稳定。

2．标准曲线蛋白质样本的准备：尽量使用与待测样本性质相近的蛋白质作为标准品，例如测定抗ti，可用纯化的抗ti作为标准。如果待测样本是未知的，也可用抗ti作为标准蛋白。通常在20ug—150ug/100ul之间绘制标准曲线。

3．将待测样本溶于缓冲溶液中，该缓冲溶液应与制作标准曲线的缓冲溶液相同(hao用pbs)。

4．按1：5用蒸馏水稀释浓染料结合溶液，如出现沉淀，过滤除去。

5．每个样本加5ml稀释的染料结合溶液，作用5～30min。染液与蛋白质结合后，将由红色变为蓝色，在595nm波长下测定其吸光度。注意，显色反应不得超过30min．

6．根据标准曲线计算待测样本的浓度。